修回日期: 2019-12-20
接受日期: 2020-01-07
在线出版日期: 2020-01-28
胃癌(gastric cancer, GC)作为消化道最常见的肿瘤之一, 在诊断时往往伴有腹腔内广泛转移, 因此进一步明确GC侵袭转移的机制至关重要, ARHI基因已经被证实对多种肿瘤细胞具有抑制作用. 进一步明确ARHI基因高表达对GC细胞的影响, 可为GC的诊断提供新思路.
本研究拟明确: ARHI基因是否抑制GC细胞株增殖能力、迁移能力、侵袭能力; 是否可促进GC细胞株凋亡. 实验结果将为GC患者的治疗提供新的基因靶点.
本研究结果显示ARHI基因可以抑制GC细胞株增殖能力、迁移能力、侵袭能力; 并促进GC细胞株MKN28的凋亡, 进一步明确了ARHI基因的功能, 为动物实验、临床实验提供了基础.
实验首选通过构建pcDNA3.1-ARHI质粒, 后转染至MKN28细胞内, 为进一步明确转然后单克隆细胞内ARHI基因及蛋白表达情况, 后进行了RT-PCR及Western blot实验; 筛选出高表达克隆株clone4后, 通过MTT实验检测细胞增殖能力; 细胞划痕实验检验细胞迁移能力; 流式细胞术检测细胞凋亡能力; Western blot实验检测细胞内蛋白表达情况.
本项实验达到预期实验结果, ARHI基因可以抑制GC细胞株增殖能力、迁移能力、侵袭能力; 并促进GC细胞株MKN28的凋亡. 为接下来动物实验及临床实验提供基础及指导.
ARHI基因过表达可抑制GC细胞MKN28的增殖, 促进细胞凋亡, 这可能与ARHI基因高表达后导致PI3K/AKT通路中的VEGF、p-AKT蛋白表达降低有关. 通过此次实验, 有望将ARHI基因作为新的基因靶点, 为GC患者的治疗提供新方案, 同时有望成为GC是否发生转移的监测指标.
实验未来研究的方向, 主要是: (1)构建动物模型, 进行组织学水平实验; (2)收集临床标本, 通过免疫组化、组织芯片等技术进一步提高说服力.