基础研究
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世界华人消化杂志. 2019-11-08; 27(21): 1304-1312
Published online 2019-11-08. doi: 10.11569/wcjd.v27.i21.1304
长链非编码RNA SNHG14通过靶向miR-144-3p调控胃癌细胞增殖和凋亡的体外实验研究
李昊天, 裴效瑞, 李洪涛, 郝明利
李昊天, 裴效瑞, 李洪涛, 郝明利, 天津市泰达医院普外科 天津市 300457
李昊天, 副主任医师, 研究方向为乳腺胃肠.
作者贡献分布: 此课题由李昊天、裴效瑞、李洪涛和郝明利设计; 研究过程由李昊天、裴效瑞、李洪涛和郝明利操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由李昊天与裴效瑞提供; 数据分析由李昊天、裴效瑞、李洪涛和郝明利完成; 本论文写作由李昊天完成.
通讯作者: 李昊天, 副主任医师, 300457, 天津市经济技术开发区第三大街65号, 天津市泰达医院普外科. sxfix5@163.com
收稿日期: 2019-09-02
修回日期: 2019-10-09
接受日期: 2019-10-16
在线出版日期: 2019-11-08
文章亮点
实验背景

胃癌发病机制尚未阐明, 我国胃癌发病率与死亡率逐年增加, 由于早期胃癌患者临床症状不明显导致患者就诊时已处于进展期甚至晚期, 临床采用手术或放化疗技术进行治疗, 效果一般, 近年来, 基因靶向治疗成为多种肿瘤治疗的新手段, 因而寻找胃癌治疗潜在靶点具有重要意义.

实验动机

本研究首先观察SNHG14在胃癌细胞中的表达, 分析其表达变化对胃癌细胞增殖及凋亡的影响, 通过starBase预测SNHG14下游可能作用的靶基因, 初步分析其对靶基因的调控作用机制, 为进一步阐释SNHG14在胃癌发生发展过程中的作用机制提供新方向.

实验目标

本研究目标是揭示SNHG14对胃癌细胞增殖及凋亡的影响及其分子机制, 为揭示胃癌的发病机制提供新策略.

实验方法

本研究采用脂质体转染技术干扰SNHG14对胃癌细胞增殖及凋亡的影响; 实时荧光定量聚合酶链反应技术检测干扰SNHG14的效果; MTT检测干扰SNHG14对胃癌细胞增殖的影响; 流式细胞仪检测干扰SNHG14对胃癌细胞凋亡的影响; 双荧光素酶报告基因实验验证SNHG14与靶基因的调控作用; 抑制靶基因表达进行回复实验以此验证SNHG14对胃癌细胞增殖及凋亡的作用; 采用Western blot法检测干扰SNHG14的表达及抑制靶基因表达对胃癌细胞中PI3K/AKT信号通路的影响.

实验结果

本研究结果表明SNHG14在胃癌细胞中高表达, 干扰SNHG14的表达可通过上调靶基因的表达从而抑制胃癌细胞增殖及促进细胞凋亡, 其作用机制可能是通过调控PI3K/AKT信号通路而发挥作用.

实验结论

SNHG14通过抑制靶基因表达从而促进胃癌细胞增殖、抑制细胞凋亡, SNHG14可能作为胃癌基因治疗的潜在靶点.

展望前景

关于SNHG14在胃癌中的作用机制还需进行体内实验及临床研究分析, 同时还可进一步验证SNHG14靶基因的下游靶mRNA, 拟寻找胃癌中LncRNA-miRNA-mRNA调控机制网络.