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北京市2345信箱 |
世界华人消化杂志
2001年10月15日;9(10):1116-1119 |
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wcjd@public.bta.net.cn |
世界华人消化杂志
ISSN 1009-3079 CN 14-1260/R |
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www.wjgnet.com |
版权归世界胃肠病学杂志社 |
⊙研究原著⊙
穴位电针对鼠胃肠粘膜免疫功能的影响
张靖1 黄裕新1 高巍1
潘伯荣2
王景杰1
李艳梅1
王庆莉1
解放军第四军医大学 1唐都医院消化内科 陕西西安 710038
2西京医院肿瘤中心
张靖,男,1972-02-26生,陕西省西安市人,汉族.1993年第四军医大学毕业,199
9级硕士研究生,导师黄裕新教授.
国家自然科学基金资组项目，No.39970888
项目负责人 黄裕新,710038,陕西省西安市新寺路,中国人民解放军
第四军医大学唐都医院消化内科.sydzj@china.com
Telephone: 0086-29-3577721
收稿日期 2001-07-05 接受日期
2001-07-28
Effects of acu-poin electro-acupun cture on gastrointentinal mucosa
immunologic function
in rats
Jing Zhang1,Yu-Xin Huang1,Wei
Gao1,Bo-Rong Pan2,Jing
-Jie Wang1,Yan-Mei Li1,
and Qing-Li Wang1
1Department of Gastroenterology,Tangdu Hospital
2Department of Oncology,Xijing Hospital,Fourth Military Medicall
Universi
ty,Xi,an 710038,Shaanxi Province,China
Supported by the National Natural Science Foundation of China,No
.39970888
Correspondence to: Yu Xin
Huang, Department of Gastroentreology
, Tangdu Hospital, Fourth Military Medical University, Xi,an 710038, Shaanxi Pr
ovince,China.
Received 2001-07-05 Accepted 2001-07-28
Abstract
AIM To explore the effect of electro-acupuncture on gastroi
ntentinal mucosal immunologic function.
METHODS 32 SD rats were randomly divided into 4 groups, acupunc
ure different acupuncture point. The contents of
secretory immunolgobulim A(sI
gA) in peripheral blood, gastric
and intestinal tissues were determined by immu
nologic radioimmunoassay(IRMA).Also intraepithelial lymphocyte(IEL) and laminia
propria lymphocyles (LPLs), proliferations were determined by
mononuclear cell
cytotoxicity assay(MTT).
RESULTS The contents of sIgA in peripheral blood,gastric,and intestinal
tissues and IELs and LPLs proliferation in zusanli group were sinific
antly higher than those of control group(55 vs 32 mg·L-1;
1759 vs
1163ug·g-1;
1403 vs 1016ug·g-1; 1.60 vs 1.15; 1.61 v
s 1.16; 1.53 vs 1.03; 1.53 vs 1.05, P≤0.01.The
contents of sIgA
in inteseines in shangjuxu group were significantly
higher than that in control
group(1388 vs 1016ug·g-1,P＜0.01>,
the contents of sIgA in perip
heral blood and gastric tissue, IELs and LPLs
proliferation was not statistical
ly different between acupuncture group and control group（P＞0.05）.
CONCLUSIONS Electro-acupuncture into zusanli may improve
sIg
A contents in peripheral blood,gastric and intestinal
tissues, and IEL and LPL,
s proliferations were improved too.
So electro-acupuncture can improve gastroi
ntentinal mucosa immunologic function, which may have important significance in
the clinical therapy with acupuncture.
Subject headings electro-acupuncture;gastrointenti nal mu
cosa immunology; function; secretory immunolgobulin A
Zhang J,Huang YX,Gao W,Pan BR,Wang JJ,Li YM,Wang QL.Effects of acu-po
in electro-acupuncture on gastrointentinal mucosa immunologic function
in rats
.Shijie Huaren Xiaohua Zazhi，2001；9(10)：1116-1119
摘 要
目的 观察穴位电针对胃肠粘膜免疫功能的影响，旨在探讨电针对胃肠道疾病防治作用及功能调整作用.
方法 32只雄性SD大鼠，随机分为4组，在清醒状态下针刺不同穴位采用
免疫放射法(IRMA)测定血清、胃肠组织中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的含量；四甲基偶氮唑
盐微量酶反应比色法(MTT)测定上皮内淋巴细胞(IEL)和固有粘膜层淋巴细胞(LPL)的增殖活
力.
结果 足三里穴组较非针刺组血清、胃肠组织中sIgA的含量均明显升高(
55比32mg·L-1;1759比1163μg·g-1;1403比1016μg·g-1;P＜
0.01)IEL及LPL的增殖活力也有明显的增强(1.6比1.15;1.61比1.16;1.53比1.03;1.53比1.0
5,P＜0.01).上巨虚穴组也较非针刺组肠组织中的sIgA的含量明显升高(1388比1016μ
g·g-1,P＜0.01)但不如足三里组显著，余各项指标无显著性差异(P＞0.0
5).
结论 针刺足三里穴可以提高正常大鼠胃肠组织中sIgA的含量，同时IEL
和LPL的增殖活力也有明显的增强，提示针刺可以提高机体的胃肠粘膜免疫力，且足
三里有一定的穴位特异性.
主题词 电针；胃肠粘膜免疫；功能；分泌型免疫球蛋白A
张靖，黄裕新，高巍，潘伯荣，王景杰，李艳梅，王庆莉.穴位电针对鼠胃肠粘
膜免疫功能的影响.
世界华人消化杂志，2001；9(10)：1116-1119
0 引言
针刺对全身细胞免疫及体
液免疫均有调节作用，此已被大量实验研究所证实［1-13].许多研究表明,对于免
疫异常所致的疾病，针刺都能通过双向调节作用而达到治疗的目的;针刺还能够通过调节免
疫功能而达到保持健康，预防疾病的目的［14-27］，然而对胃肠粘膜免疫功能的调
节作用尚未见相关性报道.胃肠道内的sIgA,IEL和LPL共同构成的胃肠粘膜免疫系统对病毒
[28-31］、肠腔内致病菌［32-34］及条件致病菌［35-40］均有抑
制作用，我们应用电针不同穴位观察血清及胃肠组织中sIgA的含量及IEL和LPL的增殖活力，
旨在探讨电针对胃肠道粘膜免疫功能的影响.
1 材料和方法
1.1 材料 雄性健康SD大鼠(本校实验动物中心提供)
，共32只，体质量(200±20)g,随机分为4组：足三里穴组、上巨虚穴组、非经非穴
组和非针刺组，每组8只.
1.2 方法 足三里穴在大鼠后膝关节下方腓骨小头外下
5mm处，直刺7mm；上巨虚穴位于大鼠后肢足三里穴向下5mm处，直刺5mm；非经非穴点取于足
三里穴旁开5mm处，直刺5mm［41］.电针仪(上海医疗仪器厂)参数选择为：断续波，频率2Hz，强度3V，以大鼠后肢轻微抖动为宜.足三里穴组大鼠于每日辰时固定后，电针双
侧足三里 穴连续刺激30min，1次 d－1,连续7d.上巨虚穴组与非经非穴组则分别选
择上巨虚穴和非经非穴点电针刺激，余同足三里穴组.非针刺组大鼠于每日辰时固定30min
，但不给予电针刺激.所有大鼠均在安静统一环境中饲养.各组大鼠于实验结束前24h禁食，可自由饮水.于d7电针结束后，用846合剂1mL·kg-1麻醉,麻醉后即刻断头取血，
置入干燥管中，4 ℃，1500r·min-1离心15min，取上清液-70℃保存待测血清中sI
gA含量.然后打开腹腔，取出胃及部分小肠，各分为两部分.一部分立即称质量，在匀浆器
内加生理盐水1mL，匀浆，4℃，1500r·min-1离心15min，取上清液-70℃保存待测
胃肠组织中sIgA含量.(组织中测得的含量÷组织质量).另一部分，则用来收集IEL和LPL
，采用Davies和Parrott(1981)的方法进行.生理盐水将胃和去除派尔结的小肠洗净，剪
成约1cm的小块，置于含20mL·L-1胎牛血清的RPMI1640培养液的三角瓶中.于37℃
，180 r·min-1的摇床上培养25～30min,收集培养液，重复此培养过程2次，将收集
的细胞用percoll分层，收集IEL，用RPMI1640洗后备用.将剩余组织用无钙镁的Hanks液和
含EDTA的无钙镁的Hanks液洗去残余的上皮细胞，再用RPMI1640液洗两遍，用眼科剪剪碎组织，胶原酶消化24h后，滤去组织碎片,离心收集细胞，RPMI1640液洗3遍，percoll分层，收
集LPL，RPMI1640洗后备用.调整细胞密度至1×109·L-1,再将上述细胞加入96孔
细胞培养板中，每孔加100μL，每个样品3个复孔，并设相应对照孔.试验孔加含10g·L
-1PHA的RPMI1640培养液100μL，对照孔加不含PHA的RPMI1640培养液100μL，混合后
置于37℃,5mL·L-1CO2孵箱内孵育68h后，每孔弃上清液100μL，加5g·L-1
的MTT10μL·-1，混匀后继续孵育4h，培养结束后每孔加0.04mol·L-1
的HCL-异丙醇100μL，充分溶解静置10min后，置酶标仪下在490nm下测其A值.以刺激指
数(SI)判断其增殖活力.SI=实验组A值÷对照组A值.应用免疫放射分析法(IRMA)测定
血清及胃肠粘膜组织中sIgA的含量.sIgA免疫放射药盒由北京北方生物制品研究所提供，严
格按照说明书要求进行操作.
统计学处理： 实验数据以x±s表示，由本校统计学教研室
提供SPLM软件系统进行数据分析.
2 结果
电针足三里后大鼠血清、胃肠组织中的sIgA的含量较非针刺组有明显的升高(P＜0.01
)，IEL和LPL的增殖活力较非针刺组也有明显的增强(P＜0.01).上巨虚组也较非针刺
组肠组织sIgA的含量有明显升高,但不及足三里组显著(表1，2).
表1 针刺腧穴后大鼠血清及胃肠组织sIgA含量
(n=8,x±s)
| 分组 |
血清/(mg·L-1) |
胃/(ug·g-1) |
肠/(ug·g-1) |
| 足三里组 |
55±10b |
1759±125a |
1403±133a |
| 上巨虚组 |
37±9 |
1188±112 |
1388±126b |
| 非经非穴组 |
29±8 |
1069±120 |
1245±120b |
| 非针刺组 |
32±10 |
1163±120 |
1016±117 |
bP＜0.01, vs非针刺组
表2 针刺腧穴后大鼠IEL和LPL的刺激指数 (n=8, x±s)
| 分组 |
IEL |
LPL |
| 胃 |
肠 |
胃 |
肠 |
| 足三里组 |
1.60±0.06b |
1.61±0.04b |
1.53±0.02b |
1.53±0.03b |
| 上巨虚组 |
1.20±0.03 |
1.22±0.04 |
1.
19±0.03 |
1.17±0.02 |
| 非经非穴组 |
1.20±0.04 |
1.19±0.04 |
1.19±0.04 |
1.18±0.03 |
| 非针刺组 |
1.15±0.02 |
1.16±0.05 |
1.03±0.02 |
1.05±0.03 |
bP＜0.01,vs非针刺组
3 讨论
大量研究证明，胃肠道是体内最大的免
疫器官［42].胃肠道粘膜免疫反应主要依靠分泌至粘膜表面及肠腔中的免疫球蛋
白(以分泌型免疫球蛋白A为主)和胃肠粘膜内以淋巴细胞为主体的免疫活性细胞,共同构成
胃肠道相关淋巴组织,共同完成胃肠道的局部免疫功能［43-57].其主要的功能有：①阻断细菌对粘膜的吸附，使其不能形成集落，从而达到排菌的目的［58-62］；
②中和病毒的作用［63,64］；③中和毒素的作用［65-68］；④对有食物摄
入和空气吸入的某些抗原物质具有封闭作用，使这些抗原游离于粘膜表面，不致进入机体，
从而避免引起全身的免疫反应［69-71］；⑤激活补体的C-3旁路途径，并于补体和
溶菌酶协同抗菌作用［72,73].一些研究表明使用糖皮质激素、胃肠外营养等干扰
了的sIgA合成，可引起胃肠道菌群的失调［74］，发生以脂肪泻为特征的消化吸收障
碍，甚至引起胃肠道细菌的易位而发生肠源性全身感染［75］，认为这种障碍的产生可能是与胃肠道的sIgA的减少而削弱了胃肠道的粘膜免疫功能有关.在预防胃肠道条件致病菌的机会感染方面，国外有人将sIgA应用到粘膜局部.研究发现，sIgA能够有效地抑制细菌
移位的发生［76].有人通过制备抗致病菌的IgA型单抗，然后将IgA型抗体用于粘膜
局部，可较好的预防肠道致病菌的感染［77］，这可能与局部的IgA的浓度增加，从
而加强了胃肠道的粘膜免疫功能.针刺可以调节机体的免疫功能已被大量实验研究和临床观察所证实，但目前研究主要是针刺<