⊙临床研究CLINICAL RESEARCH⊙

急性胰腺炎患者血清IL-15 IL-18和sTNF-1R的变化意义

贺 丽,陈少夫,曹晓辉,张力达,潘丽丽,周 卓

贺丽,沈阳医学院附属第二医院 辽宁省沈阳市 110002
陈少夫,中国医科大学第二临床学院 辽宁省沈阳市 110001
曹晓辉,沈阳急救中心 辽宁省沈阳市 110005
张力达,沈阳医学院附属第二医院 辽宁省沈阳市 110002
潘丽丽,周卓,中国医科大学第二临床学院中心实验室 辽宁省沈阳市 110001
贺丽,女,1972-08-12生,辽宁省沈阳市人,汉族.1996年毕业于大连医科大学,2002年取得硕士学位,主治医师,主要从事消化系统疾病的临床研究.
项目负责人:贺丽,110002,辽宁省沈阳市和平区北九马路20号,沈阳医学院附属第二医院.
电话:024-22842260 　　　
收稿日期:2002-07-31 接受日期:2002-08-07

Changes of serum level of IL-15, IL-18 and sTNF-1R in patients with acute pancreatitis

Li He, Shao-Fu Chen, Xiao-Hui Cao, Li- Da Zhang, Li-Li Pan, Zhuo Zhou

Li He, Digestive Department,The Second Affiliated Hospital of Shenyang Medical College, Shenyang 110002, Liaoning Province ,China
Shao-Fu Chen, Digestive Department, The Second Affiliated Hospital of China Medical University,Shenyang 110001,Liaoning Province,China
Xiao-Hui Cao,Shenyang Emergency Center, Shenyang 110005, Liaoning Province ,China
Li-Da Zhang, Digestive Department,The Second Affiliated Hospital of Shenyang Medical College, Shenyang 110002, Liaoning Province ,China
Li-Li Pan,Zhuo Zhou, Laboratory Center of The Second Affiliated Hospital of China Medical University, Shenyang 110001,Liaoning Province,China
Correspondence to : Li He, The Second Affiliated Hospital of Shenyang Medical College, Shenyang 110002, Liaoning Province,China.
Received:2002-07-31 Accepted:2002-08-07

Abstract
AIM:To detect the serum level of IL-15, IL-18 and soluble tumor necrosis factor receptor-1 (sTNF-1R) in patients with acute pancreatitis (AP), as well as the correlation among the three factors in AP.

METHODS:According to the clinical diagnosis and criteria for acute pancreatitis, 26 patients with AP were divided into severe acute pancreatitis (SAP) group (n =7) and mild acute pancreatitis (MAP) group (n =19). Ten normal individuals were used as the control group (n =10). The serum level of IL-15, IL-18 and sTNF-1R were detected by ELISA.

RESULTS:IL-15,IL-18 and STNF-1R in the SAP group was higher than that in the MAP group (IL-15, 42±19 vs 6±2 ng/l, P <0.01; IL-18,78±15 vs 28±13 ng/l,P <0.01;sTNF-1R, 6 327±3 655 vs 832±329 ng/l, P <0.01). sTNF-1R in the SAP and MAP group was higher than that in the control group (SAP vs the control group: 6 327?/FONT>3 655 vs 545?/FONT>123 ng/l, P <0.01; MAP vs the control group: 832±329 vs 545±123 ng/l, P <0.01).The results of IL-15 and IL-18 were similar to those of sTNF-1R, those in the MAP group were lower than that in the control group (MAP vs the control group, IL-18: 28±13 vs 66±10 ng/l,P <0.01; IL-15: 6±2 vs 53±13 ng/l, P <0.01). There was no significant difference between the SAP group and the control group (P > 0.05). In the MAP group, there was significant positive correlation between sTNF-1R and IL-18 (r =0.98, P <0.01), sTNF-1R and IL-15 (r =0.823, P <0.01), IL-18 and IL-15 (r =0.95, P <0.01), respectively. In the SAP group, there was significant positive correlation between IL-15 and IL-18 (r =0.906, P <0.01), sTNF-1R and IL-15 (r =0.93, P <0.01), sTNF-1R and IL-18 (r =0.953, P <0.01), respectively.

CONCLUSION:IL-15, IL-18 and sTNF-1R play important roles in the development of acute pancreatitis, and they may be valuable indexes to predict the severity of AP.

He L,Chen SF,Cao XH,Zhang LD,Pan LL,Zhou Z. Changes of serum level of IL-15, IL-18 and sTNF-1R in patients with acute pancreatitis.Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2003;11(1):57-60

摘要
目的:本实验通过测定急性胰腺炎(AP)患者血清白介素-15（IL-15）、白介素-18（IL-18）及可溶性肿瘤坏死因子受体-1（sTNF-1R）的水平，探讨他们与AP的关系.分析他们之间的相关性.研究对重症急性胰腺炎（SAP）的发生可能有预测作用的指标.探讨炎性递质在急性胰腺炎发病机制中的作用.

方法:选择AP患者26例，按照急性胰腺炎的临床诊断及分级标准分组，其中SAP患者7例，轻型急性胰腺炎（MAP）患者19例，正常对照组10例.用ELISA 法检测血清IL-15、IL-18及STNF-1R浓度.

结果:血清中 IL-15、IL-18及sTNF-1R浓度在MAP和SAP两组患者之间存在显著差异，SAP组明显高于MAP组，SAP 同MAP组比较 :IL-18:78±15 vs 28±13ng/l, (P <0.01) ;IL-15:42±19 vs 6±2 ng/l, (P <0.01);sTNF-1R:6 327±3 655 vs 832±329 ng/l, (P <0.01) ;sTNF-1R在SAP和MAP组显著高于正常对照组, SAP 同对照组比较 6327±3 655 vs 545±123 ng/l,(P <0.01);MAP同对照组比较 832±329 vs 545±123 ng/l, (P <0.01);IL-15同IL-18有相似的结果，即MAP组显著低于正常对照组, MAP同对照组比较 :IL-18 ：28±13 vs 66±10 ng/l, (P <0.01) ; IL-15: 6±2 vs 53±13 ng/l, (P <0.01) ;SAP组同正常对照组之间无显著性差异(P ＞0.05).轻型急性胰腺炎患者血清sTNF-1R 同IL-18呈显著正相关(r =0.98, P <0.01); sTNF-1R 同IL-15呈显著正相关，(r =0.823, P <0.01); IL-18同IL-15呈显著正相关，(r =0.95, P <0.01).重型急性胰腺炎患者血清IL-18同IL-15呈显著正相关，(r =0.906, P <0.01); sTNF-1R 同IL-15呈显著正相关，( r =0.93, ,P <0.01); sTNF-1R 同IL-18呈显著正相关，(r =0.953, P <0.01).

结论:血清 IL-15、IL-18及sTNF-1R参与了急性胰腺炎的炎症反应过程,可能是预测急性胰腺炎的严重程度的指标.

贺丽,陈少夫,曹晓辉,张力达,潘丽丽,周卓.急性胰腺炎患者血清IL-15 IL-18和sTNF-1R的变化意义.世界华人消化杂志 2003;11(1):57-60
http://www.wjgnet.com/1009-3079/11/57.htm


0 引言
急性胰腺炎(acute pancreatitis ,AP)是常见的消化系急症，多数属自限性.约15-30 %成为重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis, SAP）..SAP死亡率极高^[1].目前的治疗方案不能从根本上降低SAP的死亡率及并发症的发生^[2,3].至今，其发病机制仍未完全阐明^[4,5].比较公认的四大机制是胰腺胰酶自身消化^[6],胰腺血循环障碍^[7-10]，白细胞过度激活^[11-13]和肠道细菌移居胰腺组织学说^[14-19],炎性因子的产生及其级联瀑布效应(cascade teaction),使得胰腺局限性炎症反应发展为威胁生命的SAP^[20-22]越来越受到关注.我们检测AP患者血清IL-15,IL-18和可溶性肿瘤坏死因子受体-1(sTNF-1R)水平间的相关性,探讨炎性递质在AP发病机制中的作用，用于指导治疗.

1 材料和方法
1.1材料 选择2001-03/2002-01中国医大二院及沈医二院消化病房住院治疗的AP患者26例.包括男性11例，年龄44±19(范围24-70)岁;女性15例，年龄54±16(范围20-74)岁，所有患者均于症状出现后24 h内入院.体检健康者10名作对照，所有受试者无胃肠、肝胆胰疾病、糖尿病、肿瘤及自身免疫性疾病病史.把AP患者分为轻型急性胰腺炎组(mild acute pancreatitis,MAP)和重症急性胰腺炎(SAP)组.血钙浓度≤1.87mmol/L,APACHE-Ⅱ评分≥8分和Balthazar CT评分≥Ⅱ级者为SAP组,低于以上标准者为MAP组^[23,24].IL-15、IL-18和sTNF-1R试剂盒均由上海森雄公司提供.酶标仪型号为奥地利Tecan Sunrise.
1.2 方法 清晨空腹取静脉血3 mL,提取血清,平均分装于3个试管,均冻于-70 ℃冰箱保存,待测血清IL-15,IL-18,sTNF-1R浓度.采用双抗体夹心ABC-ELISA 法,在492 nm处测定吸光度(A值).所有A值都应减除空白值后再行计算.绘出标准曲线.根据样品A值求出标本中各细胞因子浓度.
   统计学处理 所有测定值均用平均数±标准差（x±s）表示，应用Studentt检验对两个样本均数做显著性检验，用直线回归方程做两因素间相关性分析.统计运用SPSS统计软件完成.

2 结果
血清中IL-15，IL-18和sTNF-1R浓度在MAP和SAP两组患者之间存在显著差异,SAP组明显高于MAP组 (P <0.01);sTNF-1R在MAP和SAP两组显著高于正常对照组（P <0.01）；IL-15同IL-18在MAP组显著低于SAP组和正常对照组(P <0.01);IL-15在SAP略低于正常对照组,而IL-18在SAP组略高于正常对照组,但两组之间无显著差异(P＞0.05,表1,图1-3).轻型急性胰腺炎患者血清sTNF-1R 同IL-18呈显著正相关(Y=-4.428± 0.0392x, r =0.98, n =19,P <0.01,图4）; sTNF-1R 同IL-15呈显著正相关 (Y=1.472±0.006x, r =0.823, n =19,P <0.01,图5); IL-18同IL-15呈显著正相关(Y=1.795±0.145x,r =0.95, n =19,P <0.01,图6). 重型急性胰腺炎患者血清IL-18同IL-15呈显著正相关(Y = -45.809±1.123x, r =0.906, n =7,P <0.01,图9 ); sTNF-1R 同IL-15呈显著正相关(Y =11.119±0.004x,r =0.93,n =7,P <0.01,图7); sTNF-1R 同IL-18呈显著正相关(Y =52.825±0.004x, r =0.953,n =7,P <0.01,图8).

表1 AP患者血清IL-15,IL-18和sTNF-1R ( , ng/L)

^bP <0.01, vs 对照组.

1组:正常对照组;2组:MAP组;3组:SAP组
图1 (PDF) 血清IL-18的浓度(ng/L).
1组:正常对照组;2组:MAP组;3组:SAP组
图2 (PDF) 血清IL-15的浓度(ng/L).
1组:正常对照组;2组:MAP组;3组:SAP组
图3 (PDF) 血清sTNF-1R的浓度(ng/L).
Y=-4.428+0.0392;r =0.98;n =19;P <0.01
图4 (PDF) 血清sTNF-1R和IL-18的相关性.
Y=1.472+0.006X;r =0.823; n =19; P <0.01
图5 (PDF) MAP组血清sTNF-1R和IL-15的相关性.
Y=1.795+0.145X; r =0.95; n =19; P <0.01
图6  (PDF) MAP组血清IL-18和IL-15的相关性.
Y=11.119+0.004X; r =0.93; n =7; P <0.01
图7  (PDF) SAP组血清sTNF-1R和IL-15的相关性.
Y=52.825+0.004X; r =0.953; n =7; P <0.01
图8  (PDF)SAP组血清sTNF-1R和IL-18的相关性.
Y=-45.809+1.123X; r =0.906; n =7; P <0.01
图9  (PDF)SAP组血清sTNF-1R和IL-18的相关性.

3 讨论
AP患者血清中前炎性递质如IL-1,IL-6,IL-8和TNFα升高,提示免疫学机制参与了AP的发病机制^[25].AP时，胰腺组织和血浆中检测到TNFa表达，并与胰腺损伤及炎症程度密切相关，在AP早期显著升高.正常对照组sTNF-1R相对低水平表达，在人体发生炎症反应时随之升高,MAP组与正常对照组比较有显著差异(P <0.01),随着炎症反应进一步加重，SAP组升高更为显著，与前两组比较均存在显著性差异(P <0.01).说明随炎症反应的进一步加重，机体的防御体系也在进一步加强，与疾病的严重程度相关.sTNF-1R升高提示炎症反应加重.但亦有相反的报道，如患者sTNF-1R早期即下降,表明受体消耗过多,导致抗炎能力下降,使得AP进一步恶化,故如sTNF-1R骤减,提示预后不良.近年来细胞因子参与AP发病过程日益受到广泛关注，IL-15在AP中的作用尚不清楚.在本实验中,MAP组患者血清IL-15浓度同正常对照组比较显著降低(P <0.01)，说明在疾病早期由于存在炎性因子的过度释放，IL-15呈低浓度表达，发挥其早期保护作用，抑制过多促炎性因子产生，而不抑制抗炎因子的作用，故可防止炎症反应进一步加剧.实验结果同时显示，SAP 组患者血清IL-15浓度明显高于MAP组.说明随炎症反应进一步加重，IL-15血清浓度随之增加，呈高浓度表达,增加了促炎因子的产生，加重了高细胞因子血症的恶性循环.SAP 组同MAP组血清IL-15浓度均低于正常对照组，SAP 组同正常对照组之间无显著性差异.说明血清IL-15在急性胰腺炎早期主要发挥其保护作用；另一可能原因是血清IL-15在入院后24 h内未达到高峰浓度，随着疾病发展，处于动态上升过程.因此，如急性胰腺炎早期血清IL-15浓度显著下降，提示预后良好.如急性胰腺炎早期血清IL-15浓度下降不明显，或轻度升高，提示预后不良，有恶化倾向.IL-18在重症急性胰腺炎患者中显著升高，在并发胰腺坏死和远处脏器衰竭中IL-18升高与并发症的发生平行.AP 患者血清中一般检测不出IL-1，可能的原因是IL-1半衰期短，临床不易测出；另一方面可能的原因是IL-1在检测水平之下发挥其生物学作用.故IL-18的检测就显得尤为重要.IL-18在疾病发生后1 wk仍明显升高,故便于跟踪监测.本实验中，SAP组患者血清IL-18浓度显著高于MAP组 (P <0.01)，说明IL-18与疾病严重程度相关.同Rau et al ^[26]结果一致.MAP组血清IL-18浓度显著低于正常对照组 (P <0.01)，而SAP组仅略高于正常对照组，二者之间无显著性差异.正常人血清中促炎细胞因子和抗炎细胞因子处于动态平衡，在炎症发生早期，促炎细胞因子大量产生同时，也产生抗炎细胞因子，这些抗炎细胞因子具有重要调节功能，能限制炎症反应.考虑AP早期血清IL-18浓度处于受抑制状态，呈低水平表达，随着炎症反应的加重，促炎细胞因子超过抗炎细胞因子的作用，加速炎症反应的过程，血清IL-18浓度随之升高.
   已有研究表明血清sTNF-1R 与IL-18浓度在SAP时显著升高，我们观察到sTNF-1R 与IL-18呈显著正相关，二者可很好预测急性胰腺炎的严重程度.IL-15同IL-18均由单核巨噬细胞系统产生，与IFN-r产生相关，具有相似的生物学作用，实验结果表明，随着病情加重，二者同时升高，且变化趋势相似，二者呈显著正相关，对AP有很好的预测作用.sTNF-1R 为TNFa的特异性受体，IL-15 能诱导TNFa的产生，sTNF-1R的产生与IL-15水平密切相关，实验结果表明,二者呈显著正相关，可预测急性胰腺炎的严重程度.

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